【京楼】[02.04]『君临天下』→Unique King← 细胞培养知识10
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4.GlutaMAX-I是什么?培养细胞如何利用GlutaMAX-I?这个二肽有多稳定? GlutaMAX-I二肽是L-谷氨酰胺的衍生物,将其不稳定的α-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽,释放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I二肽非常稳定,即使在121磅灭菌20分钟,GlutaMAX-I二肽溶液有最小的降解,如果在相同条件下,L-谷氨酰胺几乎完全降解。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 1
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5.为什么培养基中可以省去加酚红?酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 2
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6.如何用台盼兰计数活细胞? 用无血清培养基把细胞悬液稀释到200-2000个/毫升,在0.1毫升的细胞中加入0.1毫升的0.4%的台盼兰溶液。轻轻混匀,数分钟后,用血球计数板计数细胞。活细胞排斥台盼兰,因而染成蓝色的细胞是死细胞。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 4
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7.如何消除组织培养的污染?当重要的培养污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性,因而,做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 5
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这点在使用抗生素如两性霉素B和抗霉菌素如泰乐菌素时尤其重要。下面是推荐的确定毒性水平和消除培养污染的实验步骤。1)在无抗生素的培养基中消化、计数和稀释细胞,稀释到常规细胞传代的浓度。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 6
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2)分散细胞悬液到多孔培养板中,或几个小培养瓶中。在一个浓度梯度范围内,把选择抗生素加入到每一个孔中。例如,两性霉素B推荐下列浓度,0.25,0.50,1.0,2.0,4.0,8.0 mg/ml。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 7
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3)每天观测细胞毒性指标,如脱落,出现空泡,汇合度下降和变圆。4)确定抗生素毒性水平后,使用低于毒性浓度2-3倍浓度的抗生素的培养液培养细胞2-3代。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 8
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5)在无抗生素的培养基中培养细胞一代。6)重复步骤4。7)在无抗生素的培养基中培养4-6代,确定污染是否以已被消除。8.培养基中丙酮酸钠的作用是什么?======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 9
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丙酮酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源。尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是,如果没有葡萄糖的话,细胞也可以代谢丙酮酸钠。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 10
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9.Hank’s 平衡盐溶液(HBS)要在空气中使用,不需要CO2培养箱。原因是什么?======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 11
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Hank’s 平衡盐溶液(HBS)和Earle’s平衡盐溶液(EBS)有什么本质的功能差别? HBS和 EBS 的主要差别在于碳酸氢钠的水平,碳酸氢钠的含量在Eagles (2.2g/L)中比在Hanks (0.35g/L) 中高。碳酸氢钠需用高水平的CO2平衡,以维持溶液的PH值。Eagles液在空气水平的CO2 中,溶液会变碱,======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 12
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Hanks液在CO2培养箱中会变酸。如果希望在CO2培养箱中保存组织,需要用Eagles液。如果仅仅是清洗将要在细胞培养基中储存的组织,用Hanks液就可以了。10.Qualifie======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 13
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