level 1
柚子边没墙
楼主
求求了,各位师兄师姐,没有人带我,好多问题都没解决。
1、粉末状的引物,加水后浓度变为100mM后,怎么保证引物全部溶解进水里了呢,加水的体积很小啊,粉末也看不见呀。
2.程序用罗氏480跑的,跑出来数据很奇怪。上面的溶解曲线没有到平台期,下面的峰出的很小,这是什么原因啊
3.DNA在-80存放了一年,出来的峰少了一个,有没有可能是DNA断裂了?引物没有结合上去。
两个图是问题2的,第一个图是我跑的,第二个图是一年前的一个师兄跑的,上下两个图都很标准。
ps:现在我用的引物、master mix等都是过期的,MgCl2是4μM。
做的是HRM实验,引物特异性结合。



2025年07月16日 03点07分
1
1、粉末状的引物,加水后浓度变为100mM后,怎么保证引物全部溶解进水里了呢,加水的体积很小啊,粉末也看不见呀。
2.程序用罗氏480跑的,跑出来数据很奇怪。上面的溶解曲线没有到平台期,下面的峰出的很小,这是什么原因啊
3.DNA在-80存放了一年,出来的峰少了一个,有没有可能是DNA断裂了?引物没有结合上去。
两个图是问题2的,第一个图是我跑的,第二个图是一年前的一个师兄跑的,上下两个图都很标准。
ps:现在我用的引物、master mix等都是过期的,MgCl2是4μM。
做的是HRM实验,引物特异性结合。


