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采用经修饰的TN5转座酶的体外转座系统
一种体外转座系统该系统包含包括侧接一对细菌转座子Tn5外末端重复序列的可转座元件的DNA供体分子、可转座元件能够转座到其中的DNA靶分子以及一种经修饰的Tn5转座酶,该转座酶与外末端重复序列结合的亲合力高于野生型Tn5转座酶,呈失活多聚体形式的可能性低于野生型Tn5转座酶。一种对可转座DNA序列进行体外转座的系统该系统包含:相对于野生型Tn5转座酶进行过修饰的Tn5转座酶,该经修饰的转座酶包含:一个相对于野生型Tn5转座酶的变化,该变化使经修饰的转座酶与Tn5外末端重复序列结合的亲合力高于野生型Tn5转座酶;另一个相对于野生型Tn5转座酶的变化是,该变化使经修饰的转座酶呈失活多聚体形式的可能性低于野生型转座酶;DNA供体分子,该分子包含可转座的DNA序列,DNA序列的5′和3′端侧接了Tn5外末端重复序列;和可转座元件能转座到其中的DNA靶分子。
转座酶使设计动物变容易了
这一段太长,我粘些关键字
Tosk的方法甚至可以用来改正人们的遗传缺陷。现在,GM哺乳动物通常采用在卵细胞中直接插入裸露DNA的方法。但是其成功率十分低:为了得到一个GM动物,一个熟练的技术人员也不得不进行若干次插入试验,然后将其中成功的胚胎移植培养。而另一种方法是从普通细胞开始,然后尽力去克隆整合了外源DNA的少数细胞。但是该方法的效率也不高。据《新科学家》杂志报道,Tosk的方法排除了上述繁杂的操作,外源DNA被简单地插入动物的血液中。
“外源DNA被简单地插入动物的血液中。 ”让我想到了那个预言
Fogarty声称当小鼠通过尾部插入DNA而被修饰后,在其后代中约有平均40%的小鼠携带外源DNA——这是一个令人震惊的高比例。Tosk的秘密就在于使用跳动基因或转座子,它们已经在很多生物体中被发现。它们是遗传的寄生元件:没有功能的DNA环状片段,其仅有的独特能力就是在一种名叫转座酶的“剪切和粘贴”酶的帮助下通过跳入和跳出DNA来向四处传播。典型的转座子由编码转座子酶的基因所组成,其两侧带有独特的标记序列。当转座酶产生后,它以标记序列为目标导向将整个转座子剪切下来,并将它粘贴到细胞基因组别的位置上。最具活性的转座子之一就是在果蝇中发现的P-元件。数十年来,科学家们已经利用该转座子,通过将他们想转移的基因与转座酶基因相替换而制造出了转基因蝇类。
这段让我想到了克隆一十一眼睛变白,失常失控。说不定有什么寄生DNA。道金斯自私基因的理论也说DNA是自私的,生物为其容器。
2013年06月20日 08点06分























