19. High Five细胞有任何其它名称吗？High Five细胞也被称为Trichoplasia ni 5B1-4和BTI-TN-5B1-4。20.在High Five无血清培养基中去污剂的浓度是多少？ ======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

High Five无血清培养基中去污剂的浓度：0.025 g/L Tween-80，1.0 g/L Pluronic Poly-all。 21.High Five细胞用多大的密度冻存？======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

3.0x10E6 cells/ml 22.在我的果蝇培养基中发现形成白色沉淀，加热后溶解。它是什么？对我的细胞有害吗？======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

可能是谷氨酰胺沉淀，但是更可能是L-酪氨酸沉淀。培养基中谷氨酰胺的浓度比典型的2mM高6倍。======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

酪氨酸的浓度比在RPMI 1640中高25倍，而且比谷氨酰胺更加难以溶解。沉淀也可能是不止一种成分的复合物。它可能是由于贮存在局部温度较低的地方引起。只要沉淀在培养条件下可以溶解，对实验不会有不利的影响。======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

23.如何从T25瓶中转移sf9细胞？能用胰蛋白酶消化吗？ 我们强力推荐使用脱落细胞的方法，因为这项技术破坏性最小，生活力最高。通过使用巴氏德吸液管======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

，让细胞上培养基流动。作为一种选择你也可以轻轻拍打培养瓶。只有在绝对必要的情况下，才使用胰酶消化细胞。胰酶消化一个T25瓶的sf9细胞：1)去除培养基。2) 用2ml 1xPBS（足以覆盖细胞表面）洗涤细胞，去除PBS.3) 加入2ml 1x胰酶EDTA（恰好覆盖细胞表面）。4) 37 ℃孵育5到10分钟。在仪器下检测看到5分钟后它们正在向上移动。5) 向细胞中加入2ml 细胞培养液，移入锥形管，======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

深刻飛機；立刻大家；哀憐擴大解放；啦可見度法；啦可見度法；垃圾地方了；搭街坊的；浪費解放啦可見度法；啦▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂　　　　　﹏·`~thanks for everything & thanks U here~`·﹏　 　 　　一個夢想..一種執著..一份癡狂..一個舞台..一段青春..一次勝利..　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。永遠の王- -°生日快樂　　　 ▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂▂　

用2ml培养液洗瓶壁，移入同一锥形管中。（培养基中的FBS终止了胰酶的活性。）6) 离心（1100rpm）沉淀细胞。去除培养基。7) 用新的培养基重新悬浮细胞。传代。 24.在Sf9, Sf21, 和high Five细胞悬浮培养时，肝素的使用量是多少？======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

为了防止悬浮培养细胞聚集的形成，使用肝素浓度为10单位/毫升细胞悬液。 25.如何评估ES细胞合格的胎牛血清？ 使用D3 ES细胞。这是一个对于胎牛血清中生长促进、生长抑制和分化因子非常敏感的细胞系。相关生长效率分析：当ES细胞以非常低的密度传入包含10％胎牛血清的生长培养基中，检测开始和支持ES细胞克隆的能力。细胞毒分析：======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

当以非常低的密度传入包含30％胎牛血清的生长培养基中，检测ES细胞和feeder细胞的生长能力。相关形态学和分化分析：检测胎牛血清支持未分化ES细胞克隆的能力。通过碱性磷酸酶活性评估分化程度。未分化的ES细胞小颜色深红粉红，分化的细胞较大，======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

丰满，颜色较浅。所有的分析在没有ESGRO的情况下进行的，培养基中出现ESGRO会掩盖由胎牛血清所导致的问题。（ESGRO或LIF经常用来保持ES细胞处于未分化状态。）经过培养发现，大约8批中有1批可以用来培养ES细胞。======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

26.在重新冻存sf9细胞前，它可以传多少代？随着传代的次数的增加，它的感染能力会降低吗？通常情况当细胞经过30次传代后，应该返回冻存。无论什么时候记数时，都应该检查细胞活力。如果超过95％的细胞保持有活力和在大约30小时左右加倍，细胞仍然可以使用。如果活力和加倍时间下降，它们的感染力将不在是有效的。======Jeong Yoonho,Happy Birthday=====　我的愿望很简单，只希望你健康我的愿望很单纯，只希望你快乐我的愿望很诚恳，只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日，不能为你做什么，是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶，只能为你做这些，是我最大的幸福。*V^___________________________^V*　 ==============叶の子============　

其实啊喜欢你们已经一年半了`` 可是真的没有为你做什么事`` 看到你受伤``看到你难受``我什么忙也不帮不了你`` 你知道吗？ 喜欢你们真的好累`` 可是也舍不得放手``` 我是傻瓜~ 一个只会静静的看着自己爱的人， 却无能为力的傻瓜~ 因为自己或许真的很爱很爱~ 我们会为了一个从来没有正眼看过我们的人掉眼泪~ 其实我们都是傻瓜`` 天下最傻的大傻瓜`` 其实我真的不想再当一个傻瓜了`` 真的累了`` 喜欢了一年半`` 真不知道这一年半我是怎么挺过来的`` 也许你会认为说的有点夸张``可是这都是真的`` 我们可以为了一个连我们是谁都不知道的人放弃自己的幸福 我们是一个傻瓜，一个连语言不通却傻傻的盯着屏幕痴痴的笑好久的人 真的真的很爱你们`` 爱到愿意为你们放弃自己``` 爱到愿意一自己的幸福换你们的幸福和健康`` 可是你们也许永远都不知道会有我们这样的傻瓜存在`` 我们的幸福很简单~ 只要你们笑一笑~ 只要你们不再那么悲伤~ 说真的我不知道我看到你们会怎么样 也许会傻傻的站在原地爸,也许会哭吧,也许会跑掉吧(我也不知道为什么我就是觉得自己看到你们,我会跑掉,郁闷啊)太多的也许,但我可以保证的是我绝对不会去找你们要签名,也不会追着你们跑,也不会伸手去摸他们 因为我怕我自己弄疼你们,怕伤到你们 原来喜欢其他明星,总有想要得到的感觉 可是对于你，不是 我也不知道自己怎么了 怎么那么傻 但我知道 只要你们幸福,我可以什么都不要 只有傻瓜才会才会去享受一个人的恋爱`` 只有傻瓜才会为了一个永远都不知道你存在的人哭的天昏地暗`` 只有傻瓜才会看到他们受伤时希望受伤的是自己`` 只有傻瓜才会情愿别人骂自己,也不愿听到别人说他们半点坏话` 只有傻瓜才会天天趴在电脑前傻傻的笑,哇哇的哭`` 只有傻瓜才会一边写着文,一边流眼泪`` 为什么我会选择去当一个傻瓜? 我不知道`` 为什么别人骂我傻我会开心? 我不知道`` 我只知道 傻瓜---这辈子当定了`` 所以请你伤心难过的时候能想想我们这样的一群傻瓜 By:囡＆哟