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d和 Certified 胎牛血清有什么差别?Certified 胎牛血清包括了Qualified 胎牛血清执行的所有的标准检验程序,而且除了这些标准检测,Certified胎牛血清还有如下一些附加的检测:End-Point Determination of Endotoxin Content噬菌体检验生物化学检测 激素的检测血红蛋白检测Sf9 细胞生长促进及方法学检测======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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11.二价离子抑制胰蛋白酶活性吗?使用胰蛋白酶时加入EDTA的目的是什么? 二价离子的确抑制胰蛋白酶活性。EDTA用来螯合游离的镁离子和钙离子,以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建议胰蛋白酶处理细胞前,用EDTA清洗细胞,以消除来自培养基中所有的二价离子。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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12.制备 lipid-DNA的方法会影响转染效率吗? 是的。对于LIPOFECTAMlNE Reagent,稀释试剂在100μl OPTI-MEM中,稀释DNA在100μl OPTI-MEM中。混合两种溶液在室温下孵育15分钟。对于LIPOFECTIN Reagent,在加入DNA溶液前允许稀释的试剂和培养基孵育至少30分钟可以增加3倍的效率。确保复合物在没有血清的情况下形成。孵育15分钟后,在复合物中加入含有血清的培养基(800μl)。(注意以上是35mm培养皿使用体积)。对于LIPOFECTAMlNE Plus Reagent DNA应该在与脂质体混合之前首先与Plus Reagent混合。LIPOFECTAMlNE 2000的操作步骤允许在一个很小的体积下混合DNA和脂质体,接下来可以不需要换培养基的情况下直接加入。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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13.我使用SF900 Ⅱ时,细胞生长良好,但是为什么我的蛋白产物不如使用Graces 液和10%胎牛血清时效果好?======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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如果目的蛋白是一个后期蛋白,它将与蛋白酶一起表达,这些蛋白酶将会作用于目的蛋白。在加有血清的培养基中,这些蛋白酶将作用到血清中的蛋白,从而使目的蛋白产品保持完好。在无血清配方中,蛋白酶作用的唯一底物是你的目的蛋白。为了避免这一问题,加入一些蛋白酶抑制剂或加入少量的血清(少于1%),让血清给蛋白酶提供作用底物。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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14.如何检测内毒素(热源)水平?LAL(Limulus Amebocyte Lysate)试验是可用的最敏感和特异的检测细菌内毒素的方法。Levin和Bang 发现细菌可引起鲎(Limulus polyphemus)血管内的凝集作用。内毒素启动一个细胞内酶原系统(丝氨酸蛋白酶级联反应系统),通过修饰凝集素,产生一种透明的胶,======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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LAL中的凝固蛋白,从而,形成不可溶的基质。LAL试剂缓冲的鲎(血细胞)裂解物。胎牛血清的内毒素检测是在Grand Island,按照手册上Gel-clot 方法进行的。在对血清产品进行内毒素检测前,用无热源的水1:10稀释样品。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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稀释样品沸水育5分钟,以消除抑制剂。(通常,血液中的内毒素结合成份的出现会抑制凝胶过程,使内毒素不能与LAL反应。样品预先热处理可以消除这种抑制作用。)======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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15.我可以使用固体形式的Murashige Skog 培养基吗? 如果使用固体形式的培养基,需要加入琼脂。琼脂加入前要先灭菌。应该避免MS培养基的直接灭菌,应该高压灭菌琼脂溶液,然后把融化的琼脂溶液加入到MS培养基中。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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16. 20℃下配制的缓冲液,在较高或较低的温度下PH值会改变吗?对于普通使用的缓冲液,PH值随温度变化而变化。下表列出温度改变10℃时,PH值的变化情况例如 20℃下配制PH7.4 Tris缓冲液,40℃时PH值为 7.4-(2x0.310)=6.7817. 室温下(25℃)配制的======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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17.Tris-HCl溶液,在37℃使用时PH值是多少?缓冲液的PH值随温度变化而变化。下表列出了50mM Tris-HC 溶液在4℃,25℃,37℃时,不同的PH值。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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18. 昆虫细胞培养的最适PH值和渗透压是多少?生长培养基的PH值对细胞的增值和病毒或重组蛋白的生产均会产生影响。对于大部分鳞翅类昆虫细胞系,在PH值 6.0-6.4范围的大部分应用效果良好。培养鳞翅类昆虫细胞系时,培养基的最适渗透压是 345-380mOsm/kg.。为保证可靠和持久的细胞培养方式,减少技术问题,保持PH值和渗透压在以上所列的范围之内。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V* ==============叶の子============
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