【京楼】[02.04]『君临天下』→Unique King← 细胞培养知识6
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15 冷冻保存细胞之方法? 冷冻保存方法一: 冷冻管置于4 °C 30~60 分钟→ (-20 °C30 分钟*) → -80 °C 16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 长期储存。 冷冻保存方法二: 冷冻管置于已设定程序之可程序降温机中每分钟降1-3 °C 至-80 °C 以下, 再放入液氮槽vapor phase长期储存。*-20 °C 不可超过1 小时, 以防止冰晶过大,造成细胞大量死亡,亦可跳过此步骤直接放入-80°C 冰箱中,惟存活率稍微 降低一些。 ======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 1
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叶の子 楼主
16 细胞欲冷冻保存时, 细胞冷冻管内应有多少细胞浓度?冷冻管内细胞数目一般为1x106 cells/ml vial, 融合瘤细胞则以5x106 cells/ml vial 为宜。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 2
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17 应如何避免细胞污染? 细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉浆菌。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 3
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18 如果细胞发生微生物污染时,应如何处理? 直接灭菌后丢弃之。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 4
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19 支原体(mycoplasma) 污染的细胞, 是否能以肉眼观察出异状? 不能。除极有经验之专家外,大多数遭受支原体污染的细胞株, 无法以其外观分辨之。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 5
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20 支原体污染会对细胞培养有何影响? 支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数, 代谢及研究之任一数据。故进行实验前,必须确认细胞为mycoplasma-free,实验结果之数据方有意义。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 6
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21 侦测出细胞株有支原体污染时, 该如何处理?直接灭菌后丢弃,以避免污染其它细胞株。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 7
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22 CO2 培养箱之水盘如何保持清洁? 定期(至少每两周一次) 以无菌蒸馏水或无菌去离子水更换之。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 8
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23 为何培养基保存于4 °C 冰箱中, 颜色会偏暗红色, 且pH值会越来越偏碱性? 培养基保存于4 °C 冰箱中, 培养基内之CO2 会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red) 的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果, 将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时, 可以通入无菌过滤之CO2, 以调整pH 值。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 9
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24 各种细胞培养用的dish,flask是否均相同? 不同厂牌的dish 或flask, 其所coating 的polymer 不同, 制造程序亦不同, 虽对大部分细胞没有太大之影响, 惟少数细胞则可能因使用厂牌不同之dish 或flask 而有显著之生长差异。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 10
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25 购买之细胞冷冻管经解冻后,为何会发生细胞数目太少之情形? 研究人员在冷冻细胞之培养时出现细胞数目太少, 大都是因为离心过程操作上的失误, 造成细胞的物理性损伤, 以及细胞流失。建议细胞解冻后不要立刻离心, 应待细胞生长隔夜后再更换培养基即可。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 11
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26 购买之细胞死亡或细胞存活率不佳可能原因? 研究人员在细胞培养时出现存活率不佳, 常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后, 加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于-80 °C 太久。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 12
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叶の子 楼主
27 收到之冷冻管瓶身破裂,瓶盖有裂纹,或瓶盖脱落之原因? 冷冻管瓶盖裂纹,或瓶身破裂,可能是因为操作者夹取冷冻管时用力不当,造成冷冻管裂损,建议使用止血钳小心夹取。另冷冻管瓶盖松动或松脱,乃因热胀冷缩之物理现象,冷冻管有可能因此而造成细胞污染,故冷冻管于放入和取出液氮桶时,均应立刻将冷冻管再一次扭紧。======Jeong Yoonho,Happy Birthday===== 我的愿望很简单,只希望你健康我的愿望很单纯,只希望你快乐我的愿望很诚恳,只希望你幸福 2007.2.6是我陪你过的第一个生日,不能为你做什么,是我最大的遗憾。我会一直守在浩吧为你冲顶,只能为你做这些,是我最大的幸福。*V^___________________________^V*  ==============叶の子============ 
2007年02月04日 14点02分 13
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