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14C尿素呼气试验,一般建议用“尿素碳14呼气试验吗? 聊聊在诊断Hp感染方面的价值 幽门螺杆菌(Hp)定植于人类胃黏膜上皮表面与胃黏液的底层(Hp也可以定植于具有胃化生的肠道中),是一种微需氧的革兰阴性杆菌。人类是Hp的唯一宿主和传染源。“口-口”、“粪-口”是Hp的主要传播方式和途径(胃-口及医源性传播也是主要传播方式和途径)。研究证实,Hp与多种疾病相关,根除Hp是治愈和预防相关疾病以及阻断Hp传播的重要手段,而准确诊断Hp感染是根除Hp的基础。14C尿素呼气试验作为已经广泛应用于临床的Hp感染诊断方法,在Hp感染诊断中发挥着重要的作用。 一、Hp感染与多种疾病相关 1983年,澳大利亚学者Marshall和 Warren成功从慢性胃炎和消化性溃疡胃黏膜中分离并培养出Hp,并证实Hp感染是慢性胃炎和消化性溃疡的病因。这一里程碑式的发现奠定了消化性溃疡治疗的新理念,也促使Hp成为了研究的热点。 研究陆续证明,除慢性胃炎和消化性溃疡以外,Hp感染还会导致胃恶性肿瘤 (胃癌、MALT淋巴瘤)。1994年,WHO国际癌症研究机构将Hp列为I类致癌因子。现已证实Hp感染是慢性非萎缩性胃炎→萎缩性胃炎→肠上皮化生→异型增生→胃癌这一演变过程的始动因素[1]。 此外,Hp感染也与一些胃肠外的疾病发生有关,如不明原因缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜等,这些疾病已被推荐作为根除Hp的指征[2]。近年来,与Hp感染相关的疾病研究领域不断扩展,涉及广泛,包括冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑卒中、老年痴呆症、帕金森病、肥胖等,但是这些疾病与Hp的因果关系尚未明确,需要进一步的研究[2]。 二、检测Hp是预防Hp传播和根除Hp的基础 京都Hp共识(京都共识)强调,Hp相关胃炎是一种感染性疾病,可在人-人间传播。Hp所致的慢性胃炎、消化性溃疡严重影响生活质量,并可能出现并发症,甚至进展至胃恶性肿瘤。根除Hp已被证明可以长期缓解相关消化系统疾病症状,并可以预防并发症的出现,降低胃癌发生率,使80%的早期胃MALT淋巴瘤得到缓解[2]。此外,根除Hp还可以提高不明原因缺铁性贫血患者的血红蛋白水平,提高特发性血小板减少性紫癜患者的血小板水平,辅助改善维生素B12缺乏症的疗效。因此,根除Hp是减少Hp传播、预防相关疾病进展、提高疗效的关键措施,而准确检测Hp则成为根除Hp的重要基础。 三、14C尿素呼气试验在诊断Hp感染中发挥重要作用 目前临床常用的Hp检测方法有多种,可分为侵入性和非侵入性。14C尿素呼气试验作为一种非侵入性检测方法已被临床广泛应用。 1. 14C尿素呼气试验的检测原理 Hp是人体胃内唯一能够产生大量尿素酶的细菌,故可通过检测尿素酶来诊断Hp感染。当患者服用14C-尿素胶囊后,若存在Hp感染,胃中的尿素可将尿素酶分解为14CO2和氨气(是幽门螺杆菌尿素酶把服用进去的尿素分解成碳酸氢根离子和铵根离子),碳酸氢根离子经血液循环进入肺部而以二氧化碳的形式排出体外,将排出的14CO2收集在集气剂瓶中或集气卡中,通过分析呼气中14CO2的含量,即可判断有无Hp感染。 2.14C尿素呼气试验的临床应用优势 ⑴可反映整个胃内Hp感染状况:侵入性Hp检测方法需要使用胃镜取活检后进一步对标本进行检测,由于Hp在胃内并非均匀分布,因此活检标本不能反映整体胃内Hp感染状况;而尿素呼气试验收集的是整个胃内的Hp,检测结果不受Hp在胃内灶性分布的影响,可以反映整个胃内Hp感染状况。(话有不妥) ⑵具有良好的敏感度及特异性:尿素呼气试验包括13C尿素呼气试验和14C尿素呼气试验。大量研究证明,尿素呼气试验具有良好的敏感度和特异性,但是不同研究所使用的临界值间存在差异。Ferwana[3]等的一项荟萃分析对采用不同临界值的尿素呼气试验的检测敏感度和特异性进行了综合性评价。此项分析共计纳入23项研究,其中14项研究使用13C尿素呼气试验作为检测Hp感染的方法,9项研究使用14C尿素呼气试验检测Hp感染。结果显示,整体尿素呼气试验检测Hp的敏感度为96%,特异性为93%;亚组分析表明,13C尿素呼气试验和14C尿素呼气试验检测的敏感度(96% vs. 97%)和特异性(94% vs. 91%)间无显著性差异(P=0.87)。 ⑶检测准确性高、成本低:巴基斯坦Rasool[4]等的一项研究对比了14C尿素呼气试验与组织学检查和快速尿素酶检测的准确性及成本。94例连续性因消化不良症状行胃镜检查的患者被纳入研究,同时接受了14C尿素呼气试验、胃镜取活检组织学检查和快速尿素酶检测Hp。14C尿素呼气试验、胃镜取活检组织学检查和快速尿素酶检测最终诊断Hp感染阳性患者的例数相近,分别为63例(67%)、66例(70%)和61例(65%)。与组织学检查比较,14C尿素呼气试验的准确性达93%(P<0.001),阳性预测值和阴性预测值分别为97%和84%。与快速尿素酶检测比较,14C尿素呼气试验的准确性达96%(P<0.001),阳性预测值和阴性预测值分别为95%和97%。Rasool等计算了该研究中所用三种检测方法的成本,胃镜下取活检组织学检查和快速尿素酶检测的成本分别为110美元和95美元,14C尿素呼气试验的成本为15美元。 13C尿素呼气试验的检测原理与14C尿素呼气试验相同,但是13C为稳定的同位素,需要使用价格昂贵的质谱仪进行检测;而14C为不稳定同位素,可利用其放射性特征进行检测,例如液闪计数仪检测其放射性活度,价格便宜[5]。 ⑷适用于治疗复查:侵入性Hp检测方法有创且成本高,不适合用于治疗后复查。血清学试验虽然也是一种非侵入性Hp检测方法,但是血清学试验的特异性低,其阳性不一定是现症感染,不能用于根除治疗后复查。尿素呼气试验因操作简单、无创伤、价格便宜、准确性高等优势,适用于治疗后复查,是我国共识推荐的首选复查Hp的检测方法。 四、结语 14C尿素呼气试验作为一种非侵入性Hp检测方法,由于其操作快速简便、高准确性、无交叉感染、无创伤性、价格便宜等特点,已经广泛用于Hp的诊断和根除Hp后的疗效检测,为临床医生提供了可靠的诊疗依据。 小贴士: 1. 服用PPI药物的患者在Hp检测前停用PPI至少2周[2]; 2. 服用抗生素、铋剂和某些具有抗菌作用的中药的患者在Hp检测前停用药物至少4周[2]。 3. 14C尿素呼气试验使用的14C剂量极小,其辐射损害可忽略不计[5]。 参考文献: 1.谢川,吕农华. 中国HP感染的现状. 疾病监测. 2018-5-15 网络首发(http://tieba.baidu.com/mo/q/checkurl?url=http%3A%2F%2Fkns.cnki.net%2Fkcms%2Fdetail%2F11.2928.R.20180510.1738.002.html&urlrefer=cb1aaa1c37f6265a308822213fe6ca21). 2.中华医学会消化病学分会幽门螺杆菌和消化性溃疡学组, 全国幽门螺杆菌研究协作组. 第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告. 中华消化杂志. 2017,37(6):364-378. 3.FerwanaM, AbdulmajeedI, Alhajiahmed A, et al. Accuracy of urea breath test in Helicobacter pylori infection: Meta-analysis. World Journal of Gastroenterology. 2015 , 21 (4) :1305-1314. 4.Rasool S, Abid S, Jafri W. Validity and cost comparison of 14carbon urea breath test for diagnosis of H Pylori in dyspeptic patients. World Journal of Gastroenterology. 2007, 13(6):925-929. 5.成虹, 胡伏莲. 幽门螺杆菌现症感染非侵入性检查方法. 中国医药导刊. 2007, 9(2):101-102.
一起聊下尿素碳14呼气试验的安全性怎么样 一、对受检者的安全性 1. 天然辐射是一种普遍现象,碳14元素在自然界广泛存在,在我们周围的空气、土壤、水体、动植物、人体本身之中,都含有天然碳14,且基本保持不变。尿素碳14呼气试验使用的碳14胶囊剂量极小,做一次检查的照射剂量不及一天的自然本底照射剂量或相当于坐1小时的飞机旅行受到的天然宇宙射线辐射,比常见的胸透、CT等检查小得多,其辐射损害可忽略不计。 2. 尿素碳14在体内停留时间很短。尿素是人体新陈代谢的最终产物,不会在体内蓄积,其生物半衰期为6小时左右,摄入的尿素可以在48小时内从膀胱基本排出体外。如果尿素碳14被分解,则大部分会以二氧化碳的形式从呼吸道呼出,排出速度更快。 3. 通过科学的模型计算,一次尿素碳14呼气试验的平均有效剂量当量为1.59微西弗。国家标准规定的公众年剂量当量限值为1毫西弗,因此每人每年接受629次尿素碳14呼气试验也不会超标。偶然进行的一次试验甚至加上根除治疗后进行的一两次试验对受检者来说都是安全的。 二、对操作者的安全性 1. 尿素碳14胶囊没有任何外辐射。碳14衰变时产生的β射线能量很低,穿透力很弱,一张纸就可以屏蔽,因此封装在胶囊中的尿素碳14,在接收、储存、使用过程中不会对医生和患者产生外辐射。 2. 按苛刻模拟条件计算,呼气试验操作人员碳14的最大吸入量低于国家规定安全限值的万份之五,而且一过性的碳14二氧化碳不会被人体吸收。 三、对环境的友好性 1. 碳14主要来源有自然产生和人类活动产生,人类活动主要是指核爆炸和核动力生产。呼气试验使用的碳14活度为每次0.75微居里(27.75х1000贝克勒),按每年1000万次呼气试验计算,碳14总排放量为人类核活动的0.15%,占天然平衡总量的比例更小,呼气试验产生的气态、液态、固态放射性废物浓度均远远低于国家规定的直接排放标准。 2. 呼气试验使用的碳14是核反应堆运行的副产物,只要反应堆运行就会产生碳14,不做呼气试验,这些碳14也会以其它形式向环境排放,因此,碳14呼气试验不会对环境产生额外负担。 四、关于尿素碳14呼气试验放射性豁免规定 1. 2002年5月20日,国家环境保护总局办公厅发布放射性豁免管理批准函,主要内容是:“含有0.75微居里的14C尿素胶囊用于幽门螺杆菌感染体内诊断,对环境、患者和医生,其辐射影响都是非常微小的,从辐射防护的角度判断是安全的;在诊断过程中产生的废物可作为普通废物处理。因此,含有0.75微居里的14C尿素胶囊用于幽门螺杆菌感染体内诊断,无须采取任何辐射防护措施”,对用于幽门螺杆菌诊断的尿素14C胶囊豁免放射性管理。国家药监局2003年199号文、2011年474号函反复明确规定:使用尿素14C呼气试验药盒用于诊断幽门螺杆菌感染的医疗机构无需持有《放射性药品使用许可证》。 2. 实际上,早在1997年12月26日,首先批准碳14呼气试验药品的美国就已经批准了1微居里尿素碳14呼气试验的豁免管理。美国原子能管理委员会判定1微居里14C胶囊的辐射风险十分微小可忽略不计,认为没有必要对该药物进行法规控制,允许任何人接收、持有、使用和运输诊断用的1微居里尿素14C胶囊。 3. 国家环保总局放射性豁免管理批文明确指出,尿素碳14胶囊用于幽门螺杆菌感染体内诊断时产生的废物可作为普通废物处理。 (相关文件见附图) 五、关于孕妇、哺乳期妇女及儿童用药 1、 我国CFDA和美国FDA批准的产品使用说明并没有严格禁止孕妇和哺乳期妇女作此试验,因为并没有任何证据表明该试验会对孕妇和胎儿及哺乳期母婴造成伤害。为了避免不必要的麻烦,医疗机构、医生和就诊者均应采取措施避免误用。医疗机构呼气试验场所应有醒目的警示语,医生在实施呼气试验前应询问就诊者是否处于孕期或哺乳期,就诊者也应注意就诊安全。 2. 基于伦理学的原因,此试验也不可能进行儿童的临床研究,因此缺少针对儿童进行碳14呼气试验的安全性评价资料。但是美国FDA允许儿童和成年人一样进行14C呼气试验,剂量也不必调整,我国CFDA也未限制碳14呼气试验用于儿童。 3. 如果发生误用情况,也不要过于焦虑。首先应向主治医生说明情况并按医嘱采取相应措施,也可以采取暂停哺乳2~3天、多喝水等办法。由于未分解的尿素或尿素分解产生的二氧化碳都属于人体排泄物,可以在较短时间内排出体外,不会累积,因此误用尿素碳14给人体带来的辐射影响非常微小,可以忽略不计。采用多喝水排出体外即可。
请问下幽门螺杆菌检测方法的发展与比较是怎样的? 幽门螺杆菌检测方法的发展与比较 幽门螺杆菌(Hp)感染人类至少已有8.8 万~11.6万年[1]。但是30多年前(1983年),澳大利亚学者Barry Marshall和Robin Warren才首次分离培养了Hp,并证明这是一种可以导致胃炎、消化性溃疡的细菌。这一发现也成为了消化系统疾病诊治领域的重要里程碑。随后,研究证明,Hp感染是慢性胃炎和消化性溃疡最主要的病因(占70%~90%),是人类胃癌致病菌,但是清除Hp可以预防和降低上述胃部疾病的发生。那么如何准确检测Hp也就成为了清除Hp治疗的重要基础。 一、Hp检测方法的历史演变 Marshall和Warren是从胃炎患者的胃黏膜活检标本中分离培养出Hp的。在这两位学者之前,已有研究者在显微镜下观察到胃组织学标本中的“螺旋状细菌”[2]。他们所使用的就是最早的Hp的检测方法——组织学检查和分离培养。 在Marshall和Warren成功分离培养Hp后的两年,即1985年,McNulty发明了快速尿素酶试验(RUT);1987年,Gramham和Bell又发明了13C和14C尿素呼气试验(UBT);1990年,Hoshina创立了Hp的PCR检测法[2]。 之后,随着免疫学技术、分子生物学技术和内镜检测技术的快速发展,Hp检测技术中又陆续出现了血清学抗体检测、粪便Hp抗原检测(SAT)、内镜成像和其他的分子生物学检测方法。 二、Hp检测方法的差异性及影响因素 1.侵入性vs. 非侵入性 上述临床常用的Hp检测方法可以分为侵入和非侵入两大类。侵入性试验包括内镜成像、组织学检查、RUT、分离培养和以PCR为代表的分子生物学检测。非侵入性试验则包括UBT、SAT、Hp血清学检测和分子生物学检测。 侵入性检测需要通过胃镜取得活检标本后再对标本进行检测,其缺点是有一定创伤性,结果会受到活检部位的影响;但是可以同时明确有无胃癌、消化性溃疡、胃炎等重要疾病。 非侵入性检测无需经胃镜活检,是无创伤性且使用方便的检测方法,同时也避免了活检部位对结果的影响。 2.敏感性和特异性 各种Hp的临床常用检测方法在特异性、敏感性方面存在一定差异(表1)。其中,分离培养的特异性最高,但是敏感性最差。血清学试验的特异性最差。其他各种方法均具有相对较高的特异性和敏感性。 表1 临床常用Hp检测方法特异性、敏感性比较[3] 检测方法 敏感性 特异性 血清学试验 85% 79% UBT 75%~100% 77%~100% SAT 67%~100% 61%~100% 快速尿素酶试验 75%~100% 84%~100% 组织学检查 66%~100% 94%~100% PCR 75%~100% 84%~100% 分离培养 55%~56% 100% 3.影响Hp检测准确性的因素 ⑴药物 UBT、SAT、RUT、组织学检查、内镜成像技术都会受到药物的影响。具体包括:①抗生素、铋剂和某些具有抗菌作用的中药,这些药物可以抑制Hp生长,降低其活性;②PPI,作为常用的抑制胃酸分泌的药物,PPI可以显著提高胃内pH水平,从而抑制Hp尿素酶活性,因此会影响两种常用的尿素酶活性试验(UBT、RUT)的准确性,造成假阴性[4]。 [提示]:服用上述药物的患者只要在检测Hp前停用所服用的药物,就能消除对Hp检测结果的影响。服用PPI药物的患者在Hp检测前停用PPI至少2周,服用抗生素、铋剂和某些具有抗菌作用的中药的患者在Hp检测前停用药物至少4周[4]。 ⑵设备、检测者经验:分子生物学检测、内镜成像、分离培养、组织学检查都对设备或检测者经验方面有较高要求。 ⑶特殊临床情况:消化性溃疡出血、胃MALT淋巴瘤、胃黏膜严重萎缩、胃部分切除患者存在Hp干扰因素或Hp菌量少,易造成假阴性结果。 三、常用Hp检测方法优劣势及应用范围 1.尿素呼气试验(UBT) UBT是非侵入性检测方法中应用时间最长,临床应用最广的一种,其具有准确性相对较高、操作方便和不受Hp胃内灶性分布影响等优点,因此UBT是我国Hp感染专家共识认为的最受推荐的诊断方法,也是Hp清除治疗后疗效评估的首选方法[4]。 2.粪便Hp抗原检测(SAT) SAT也是一种操作简便、快速和安全的非侵入性检测方法,在我国因缺少相关试剂盒而较少应用。共识推荐SAT可作为诊断及根除治疗后疗效评价的备选方法,在尿素呼气试验配合欠佳人员(儿童等)的检测中更具优势[4]。 3.血清学检测 血清学试验的特异性低,其阳性不一定是现症感染,不能用于根除治疗后复查,因此其临床应用受限,更适用于一些特定情况,例如消化性溃疡出血、胃MALT淋巴瘤和严重胃黏膜萎缩[4]。 4.快速尿素酶试验(RUT) RUT是最快速、方便、经济的一种侵入性检测方法。但是,其检测结果受试剂pH值、取材部位、组织大小、细菌量、观察时间、环境温度及抗生素、质子泵抑制剂(PPIs)、急性胃出血等因素影响。多点活检可提高RUT检测准确性。患者接受胃镜检查时建议常规行RUT[4]。 5.组织学检查 组织学检查的诊断准确性高,但是结果受标本部位、大小、数量,染色方法和检测者经验及药物影响,且价格高。在组织学检查未能发现Hp时,可以联合UBT[4],以弥补标本及染色方法对结果的影响。 6.分离培养 分离培养的特异性最高,但是敏感性最低,同时操作复杂、耗时、需一定实验室条件、标本转送培养需专门的转送液并保持低温,受多种因素影响,不推荐单纯用于临床的常规诊断[4]。 7.内镜成像技术 内镜成像技术需要相应设备,检查医师需经过相关培训,其准确度和特异性也存在较大差异,因此目前不推荐常规应用[4]。 8.分子生物学检测 分子生物学检测是同属于非侵入和侵入的唯一一种检测方法,既可以用于检测胃黏膜标本,也可用于检测粪便、血清等标本。虽然PCR能更快速、更精确地检测Hp、Hp基因型及其耐药菌株,但成本、实验设备等都影响着PCR在临床的应用。目前,共识推荐将分子生物学检测用于Hp药物敏感度,即耐药基因的检测[4]。 四、结语 Hp的准确诊断是开展Hp根除治疗的重要依据,同时在根除治疗后,评价疗效及监测复发和再感染方面都发挥着重要作用。临床实践中,选择Hp感染的检测方法取决于每种方法的优缺点与可操作性以及每例患者独特的临床状况。我国的专家共识根据不同应用目的和检测样本进行了推荐,实际应用中可以结合2种或2种以上检测方法以获取最可靠的结果。在未来,研究者会持续改进Hp的检测方法,从而使Hp感染的诊断更为可靠,诊断模式更为合理。 参考文献: 1.张澍田,程芮.从不同角度看幽门螺杆菌.中华内科杂志, 2018,57(6) : 389-392. 2.胡伏莲,周殿元.幽门螺杆菌感染的基础与临床.1版.中国科学技术出版社,2002. 3.SK Patel , CB Pratap, AK Jain. Diagnosis of Helicobacter pylori : What should be the goldstandard?World Journal of Gastroenterology , 2014 , 20 (36) :12847-12859. 4.中华医学会消化病学分会幽门螺杆菌和消化性溃疡学组,全国幽门螺杆菌研究协作组.第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告.中华消化杂志, 2017,37(6):364-378.
聊下14C尿素呼气试验(建议用“尿素碳14呼气试验” 14C尿素呼气试验(建议用“尿素碳14呼气试验”)在诊断Hp感染方面的价值 幽门螺杆菌(Hp)定植于人类胃黏膜上皮表面与胃黏液的底层(Hp也可以定植于具有胃化生的肠道中),是一种微需氧的革兰阴性杆菌。人类是Hp的唯一宿主和传染源。“口-口”、“粪-口”是Hp的主要传播方式和途径(胃-口及医源性传播也是主要传播方式和途径)。研究证实,Hp与多种疾病相关,根除Hp是治愈和预防相关疾病以及阻断Hp传播的重要手段,而准确诊断Hp感染是根除Hp的基础。14C尿素呼气试验作为已经广泛应用于临床的Hp感染诊断方法,在Hp感染诊断中发挥着重要的作用。 一、Hp感染与多种疾病相关 1983年,澳大利亚学者Marshall和 Warren成功从慢性胃炎和消化性溃疡胃黏膜中分离并培养出Hp,并证实Hp感染是慢性胃炎和消化性溃疡的病因。这一里程碑式的发现奠定了消化性溃疡治疗的新理念,也促使Hp成为了研究的热点。 研究陆续证明,除慢性胃炎和消化性溃疡以外,Hp感染还会导致胃恶性肿瘤 (胃癌、MALT淋巴瘤)。1994年,WHO国际癌症研究机构将Hp列为I类致癌因子。现已证实Hp感染是慢性非萎缩性胃炎→萎缩性胃炎→肠上皮化生→异型增生→胃癌这一演变过程的始动因素[1]。 此外,Hp感染也与一些胃肠外的疾病发生有关,如不明原因缺铁性贫血、特发性血小板减少性紫癜等,这些疾病已被推荐作为根除Hp的指征[2]。近年来,与Hp感染相关的疾病研究领域不断扩展,涉及广泛,包括冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑卒中、老年痴呆症、帕金森病、肥胖等,但是这些疾病与Hp的因果关系尚未明确,需要进一步的研究[2]。 二、检测Hp是预防Hp传播和根除Hp的基础 京都Hp共识(京都共识)强调,Hp相关胃炎是一种感染性疾病,可在人-人间传播。Hp所致的慢性胃炎、消化性溃疡严重影响生活质量,并可能出现并发症,甚至进展至胃恶性肿瘤。根除Hp已被证明可以长期缓解相关消化系统疾病症状,并可以预防并发症的出现,降低胃癌发生率,使80%的早期胃MALT淋巴瘤得到缓解[2]。此外,根除Hp还可以提高不明原因缺铁性贫血患者的血红蛋白水平,提高特发性血小板减少性紫癜患者的血小板水平,辅助改善维生素B12缺乏症的疗效。因此,根除Hp是减少Hp传播、预防相关疾病进展、提高疗效的关键措施,而准确检测Hp则成为根除Hp的重要基础。 三、14C尿素呼气试验在诊断Hp感染中发挥重要作用 目前临床常用的Hp检测方法有多种,可分为侵入性和非侵入性。14C尿素呼气试验作为一种非侵入性检测方法已被临床广泛应用。 1. 14C尿素呼气试验的检测原理 Hp是人体胃内唯一能够产生大量尿素酶的细菌,故可通过检测尿素酶来诊断Hp感染。当患者服用14C-尿素胶囊后,若存在Hp感染,胃中的尿素可将尿素酶分解为14CO2和氨气(是幽门螺杆菌尿素酶把服用进去的尿素分解成碳酸氢根离子和铵根离子),碳酸氢根离子经血液循环进入肺部而以二氧化碳的形式排出体外,将排出的14CO2收集在集气剂瓶中或集气卡中,通过分析呼气中14CO2的含量,即可判断有无Hp感染。 2.14C尿素呼气试验的临床应用优势 ⑴可反映整个胃内Hp感染状况:侵入性Hp检测方法需要使用胃镜取活检后进一步对标本进行检测,由于Hp在胃内并非均匀分布,因此活检标本不能反映整体胃内Hp感染状况;而尿素呼气试验收集的是整个胃内的Hp,检测结果不受Hp在胃内灶性分布的影响,可以反映整个胃内Hp感染状况。(话有不妥) ⑵具有良好的敏感度及特异性:尿素呼气试验包括13C尿素呼气试验和14C尿素呼气试验。大量研究证明,尿素呼气试验具有良好的敏感度和特异性,但是不同研究所使用的临界值间存在差异。Ferwana[3]等的一项荟萃分析对采用不同临界值的尿素呼气试验的检测敏感度和特异性进行了综合性评价。此项分析共计纳入23项研究,其中14项研究使用13C尿素呼气试验作为检测Hp感染的方法,9项研究使用14C尿素呼气试验检测Hp感染。结果显示,整体尿素呼气试验检测Hp的敏感度为96%,特异性为93%;亚组分析表明,13C尿素呼气试验和14C尿素呼气试验检测的敏感度(96% vs. 97%)和特异性(94% vs. 91%)间无显著性差异(P=0.87)。 ⑶检测准确性高、成本低:巴基斯坦Rasool[4]等的一项研究对比了14C尿素呼气试验与组织学检查和快速尿素酶检测的准确性及成本。94例连续性因消化不良症状行胃镜检查的患者被纳入研究,同时接受了14C尿素呼气试验、胃镜取活检组织学检查和快速尿素酶检测Hp。14C尿素呼气试验、胃镜取活检组织学检查和快速尿素酶检测最终诊断Hp感染阳性患者的例数相近,分别为63例(67%)、66例(70%)和61例(65%)。与组织学检查比较,14C尿素呼气试验的准确性达93%(P<0.001),阳性预测值和阴性预测值分别为97%和84%。与快速尿素酶检测比较,14C尿素呼气试验的准确性达96%(P<0.001),阳性预测值和阴性预测值分别为95%和97%。Rasool等计算了该研究中所用三种检测方法的成本,胃镜下取活检组织学检查和快速尿素酶检测的成本分别为110美元和95美元,14C尿素呼气试验的成本为15美元。 13C尿素呼气试验的检测原理与14C尿素呼气试验相同,但是13C为稳定的同位素,需要使用价格昂贵的质谱仪进行检测;而14C为不稳定同位素,可利用其放射性特征进行检测,例如液闪计数仪检测其放射性活度,价格便宜[5]。 ⑷适用于治疗复查:侵入性Hp检测方法有创且成本高,不适合用于治疗后复查。血清学试验虽然也是一种非侵入性Hp检测方法,但是血清学试验的特异性低,其阳性不一定是现症感染,不能用于根除治疗后复查。尿素呼气试验因操作简单、无创伤、价格便宜、准确性高等优势,适用于治疗后复查,是我国共识推荐的首选复查Hp的检测方法。 四、结语 14C尿素呼气试验作为一种非侵入性Hp检测方法,由于其操作快速简便、高准确性、无交叉感染、无创伤性、价格便宜等特点,已经广泛用于Hp的诊断和根除Hp后的疗效检测,为临床医生提供了可靠的诊疗依据。 小贴士: 1. 服用PPI药物的患者在Hp检测前停用PPI至少2周[2]; 2. 服用抗生素、铋剂和某些具有抗菌作用的中药的患者在Hp检测前停用药物至少4周[2]。 3. 14C尿素呼气试验使用的14C剂量极小,其辐射损害可忽略不计[5]。 参考文献: 1.谢川,吕农华. 中国HP感染的现状. 疾病监测. 2018-5-15 网络首发(http://tieba.baidu.com/mo/q/checkurl?url=http%3A%2F%2Fkns.cnki.net%2Fkcms%2Fdetail%2F11.2928.R.20180510.1738.002.html&urlrefer=cb1aaa1c37f6265a308822213fe6ca21). 2.中华医学会消化病学分会幽门螺杆菌和消化性溃疡学组, 全国幽门螺杆菌研究协作组. 第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告. 中华消化杂志. 2017,37(6):364-378. 3.FerwanaM, AbdulmajeedI, Alhajiahmed A, et al. Accuracy of urea breath test in Helicobacter pylori infection: Meta-analysis. World Journal of Gastroenterology. 2015 , 21 (4) :1305-1314. 4.Rasool S, Abid S, Jafri W. Validity and cost comparison of 14carbon urea breath test for diagnosis of H Pylori in dyspeptic patients. World Journal of Gastroenterology. 2007, 13(6):925-929. 5.成虹, 胡伏莲. 幽门螺杆菌现症感染非侵入性检查方法. 中国医药导刊. 2007, 9(2):101-102.
聊聊尿素碳14呼气试验的安全性 尿素碳14呼气试验的安全性 一、对受检者的安全性 1. 天然辐射是一种普遍现象,碳14元素在自然界广泛存在,在我们周围的空气、土壤、水体、动植物、人体本身之中,都含有天然碳14,且基本保持不变。尿素碳14呼气试验使用的碳14胶囊剂量极小,做一次检查的照射剂量不及一天的自然本底照射剂量或相当于坐1小时的飞机旅行受到的天然宇宙射线辐射,比常见的胸透、CT等检查小得多,其辐射损害可忽略不计。 2. 尿素碳14在体内停留时间很短。尿素是人体新陈代谢的最终产物,不会在体内蓄积,其生物半衰期为6小时左右,摄入的尿素可以在48小时内从膀胱基本排出体外。如果尿素碳14被分解,则大部分会以二氧化碳的形式从呼吸道呼出,排出速度更快。 3. 通过科学的模型计算,一次尿素碳14呼气试验的平均有效剂量当量为1.59微西弗。国家标准规定的公众年剂量当量限值为1毫西弗,因此每人每年接受629次尿素碳14呼气试验也不会超标。偶然进行的一次试验甚至加上根除治疗后进行的一两次试验对受检者来说都是安全的。 二、对操作者的安全性 1. 尿素碳14胶囊没有任何外辐射。碳14衰变时产生的β射线能量很低,穿透力很弱,一张纸就可以屏蔽,因此封装在胶囊中的尿素碳14,在接收、储存、使用过程中不会对医生和患者产生外辐射。 2. 按苛刻模拟条件计算,呼气试验操作人员碳14的最大吸入量低于国家规定安全限值的万份之五,而且一过性的碳14二氧化碳不会被人体吸收。 三、对环境的友好性 1. 碳14主要来源有自然产生和人类活动产生,人类活动主要是指核爆炸和核动力生产。呼气试验使用的碳14活度为每次0.75微居里(27.75х1000贝克勒),按每年1000万次呼气试验计算,碳14总排放量为人类核活动的0.15%,占天然平衡总量的比例更小,呼气试验产生的气态、液态、固态放射性废物浓度均远远低于国家规定的直接排放标准。 2. 呼气试验使用的碳14是核反应堆运行的副产物,只要反应堆运行就会产生碳14,不做呼气试验,这些碳14也会以其它形式向环境排放,因此,碳14呼气试验不会对环境产生额外负担。 四、关于尿素碳14呼气试验放射性豁免规定 1. 2002年5月20日,国家环境保护总局办公厅发布放射性豁免管理批准函,主要内容是:“含有0.75微居里的14C尿素胶囊用于幽门螺杆菌感染体内诊断,对环境、患者和医生,其辐射影响都是非常微小的,从辐射防护的角度判断是安全的;在诊断过程中产生的废物可作为普通废物处理。因此,含有0.75微居里的14C尿素胶囊用于幽门螺杆菌感染体内诊断,无须采取任何辐射防护措施”,对用于幽门螺杆菌诊断的尿素14C胶囊豁免放射性管理。国家药监局2003年199号文、2011年474号函反复明确规定:使用尿素14C呼气试验药盒用于诊断幽门螺杆菌感染的医疗机构无需持有《放射性药品使用许可证》。 2. 实际上,早在1997年12月26日,首先批准碳14呼气试验药品的美国就已经批准了1微居里尿素碳14呼气试验的豁免管理。美国原子能管理委员会判定1微居里14C胶囊的辐射风险十分微小可忽略不计,认为没有必要对该药物进行法规控制,允许任何人接收、持有、使用和运输诊断用的1微居里尿素14C胶囊。 3. 国家环保总局放射性豁免管理批文明确指出,尿素碳14胶囊用于幽门螺杆菌感染体内诊断时产生的废物可作为普通废物处理。 (相关文件见附图) 五、关于孕妇、哺乳期妇女及儿童用药 1、 我国CFDA和美国FDA批准的产品使用说明并没有严格禁止孕妇和哺乳期妇女作此试验,因为并没有任何证据表明该试验会对孕妇和胎儿及哺乳期母婴造成伤害。为了避免不必要的麻烦,医疗机构、医生和就诊者均应采取措施避免误用。医疗机构呼气试验场所应有醒目的警示语,医生在实施呼气试验前应询问就诊者是否处于孕期或哺乳期,就诊者也应注意就诊安全。 2. 基于伦理学的原因,此试验也不可能进行儿童的临床研究,因此缺少针对儿童进行碳14呼气试验的安全性评价资料。但是美国FDA允许儿童和成年人一样进行14C呼气试验,剂量也不必调整,我国CFDA也未限制碳14呼气试验用于儿童。 3. 如果发生误用情况,也不要过于焦虑。首先应向主治医生说明情况并按医嘱采取相应措施,也可以采取暂停哺乳2~3天、多喝水等办法。由于未分解的尿素或尿素分解产生的二氧化碳都属于人体排泄物,可以在较短时间内排出体外,不会累积,因此误用尿素碳14给人体带来的辐射影响非常微小,可以忽略不计。采用多喝水排出体外即可。
阐述谈“Hp”色变:该检测吗?怎样检测? 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)感染是一种常见的慢性感染性疾病。在过去的30年中,由于全球人口的增长、Hp根除失败、Hp重复感染等因素,Hp感染人数有增长的趋势[1]。研究结果表明[2],全球近一半人口感染了Hp,且不同地理区域、不同国家的人群Hp感染的现患率差异较大,现患率最高的三个区域分别为非洲(79.1%),拉丁美洲和加勒比地区(54.7%)以及亚洲(54.7%),最低的两个区域为北美洲(37.1%)和大洋洲(24.4%),该研究中显示我国的现患率为55.8%,这是做了Hp检测,显示为阳性的人群,实际的感染人群应该更大。 如此高的感染率,对实际工作中的Hp诊断的规范性提出了挑战,毕竟对人群进行大规模Hp普查并不现实,那么究竟哪些人群需要进行Hp检测?应该如何检测? 哪些人群需要进行Hp检测? 在我国最新的幽门螺杆菌感染处理共识报告中[3],对Hp的根除指征进行了规范(表1),当考虑患者存在根除适应证时,需要积极地进行Hp检测。而且指南指出,在对Hp进行清除治疗后,应进行复查以明确Hp是否已经被根除[4]。 表1 幽门螺杆菌根除指征 幽门螺杆菌阳性 强烈推荐 推荐 消化性溃疡(无论是否活动和有无并发症史) ✔️ 胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤 ✔️ 慢性胃炎伴消化不良症状 ✔️ 慢性胃炎伴胃黏膜萎缩、糜烂 ✔️ 早期胃肿瘤已行内镜下切除或胃次全切手术 ✔️ 长期服用质子泵抑制剂 ✔️ 胃癌家族史 ✔️ 计划长期服用非甾体抗炎药(包括低剂量阿司匹林) ✔️ 不明原因的缺铁性贫血 ✔️ 特发性血小板减少性紫癜 ✔️ 其他幽门螺杆菌相关疾病(淋巴细胞性胃炎、增生性胃息肉、Menetrier病) ✔️ 证实有幽门螺杆菌感染 ✔️ 如何选择Hp的检测方式? Hp的检测包括了侵入式和非侵入式两大类,每一类均有不同的检测方式(图1)。 图1 Hp检测方式 由上图可以看出Hp检测方式较多,所以医生应根据患者的实际情况建立诊断思路,规范选择合适的检测方式[5](图2),对患者目前是否被Hp感染以及根除治疗后的Hp根除情况进行科学的评估,避免诊断结果的偏差。 图1 诊断Hp感染流程图 总的来说,经过初步判断后认为患者需行Hp检测时,首先应判断该患者是否有行胃镜检查的指征。当患者存在胃镜检查指征时,就需要考虑采用侵入式检测方式。不同检测方式的选择同样是有要求的,如患者近期使用过PPI/铋剂/抗生素,在胃镜检查时发现活动性出血或者镜下表现提示需要活检时,则需要在胃镜检查时取活检进行组织学检查,否则的话行快速尿素酶试验即可。Hp培养、PCR检测虽然特异性高,但是操作过程需要较高的试验条件,且操作复杂耗时、费用高,多用于药敏试验指导临床用药,亦可用于科研。侵入式检测一个较为明显的缺点是在活检时可能由于Hp在胃内分布不均,未取得Hp感染灶而出现一个假阴性结果。所以如图1所示,如果患者在活检后为Hp检测为阴性结果,应进一步采取非侵入的检测方式进一步确认。 如果患者没有胃镜指征,则考虑采用非侵入的检测方式。即同位素示踪法、粪便Hp抗原检测以及血清抗体检测。但这些检测方式并不适合所有的患者,在对患者进行检测时也是有选择性的。在同位素示踪法中,呼气试验与N排出试验相比,操作更为简便易行,患者接受程度更高。呼气试验和粪便抗原检测均可用于Hp的现症感染和清除效果的评估。研究结果表明,呼气试验的敏感性和特异性均超过了95%[6]。粪便抗原检测诊断的敏感性和特异性均超过了92%[6, 7]。在目前发表的指南中,部分指南并没有明确呼气试验和粪便抗原检测相比,哪个更应该优先被选择作为非侵入检测方式的首选[4, 8]。但是也有指南因为呼气试验的准确性更高而推荐了其作为非侵入检测方式的首选[9]。而对于血清Hp抗体检测而言,在Hp感染后,血清中的抗体会持续多年,研究结果表明,血清学检测对于Hp现症感染检测的敏感性已经<80%[6],所以与其他的非侵入式检测方式相比,血清学检测在评估Hp现症感染和清除效果两个方面,均不占优势。 由此可知,对于需要行Hp检测的患者,如果该患者有胃镜指征,则需要根据患者近期的服药史及镜下所见选择合适的检测方式来评估患者是否有Hp感染,而对于没有胃镜指征的患者来讲,采取呼气试验进行Hp现症感染及根除治疗后的评估是一种相对来说比较简便可靠的检测方式。 总结 根据目前的研究结果,Hp感染率依然居高不下。由于Hp感染与多种疾病相关,所以临床医生在工作中应谨慎甄别需进行Hp检测的人群,并建立科学的诊断思路,做到根据患者的病情个性化的选择诊断方式。 参考文献: 1.Hu, Y., et al., Systematic review with meta-analysis: the global recurrence rate of Helicobacter pylori. Aliment Pharmacol Ther, 2017. 46(9): p. 773-779. 2.Hooi, J.K.Y., et al., Global Prevalence of Helicobacter pylori Infection: Systematic Review and Meta-Analysis. Gastroenterology, 2017. 153(2): p. 420-429. 3.刘文忠, et al., 第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告. 中华消化杂志, 2017. 37(06): p. 364-378. 4.Chey, W.D., et al., ACG Clinical Guideline: Treatment of Helicobacter pylori Infection. Am J Gastroenterol, 2017. 112(2): p. 212-239. 5.J Thomas Lamont, M.F., Shilpa Grover. Indications and diagnostic tests for Helicobacter pylori infection. 2020; Available from: http://tieba.baidu.com/mo/q/checkurl?url=https%3A%2F%2Fwww.uptodate.com%2Fcontents%2Fimage%3FtopicKey%3DGAST%252F18%26search%3DHelicobacter%2520pylori%26view%3Dpowerpoint%26imageKey%3DGAST%252F112677%26rank%3D2~150%26source%3Dsee_link%26sp%3D0.&urlrefer=f1150f4a89d41d05a7c62699e0cc907f 6.Chey, W.D., B.C. Wong, and G. Practice Parameters Committee of the American College of, American College of Gastroenterology guideline on the management of Helicobacter pylori infection. Am J Gastroenterol, 2007. 102(8): p. 1808-25. 7.Veijola, L., et al., Stool antigen tests in the diagnosis of Helicobacter pylori infection before and after eradication therapy. World J Gastroenterol, 2005. 11(46): p. 7340-4. 8.El-Serag, H.B., et al., Houston Consensus Conference on Testing for Helicobacter pylori Infection in the United States. Clin Gastroenterol Hepatol, 2018. 16(7): p. 992-1002 e6. 9.Malfertheiner, P., et al., Management of Helicobacter pylori infection-the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut, 2017. 66(1): p. 6-30.
专业:幽门螺杆菌检测方法的发展与比较! 幽门螺杆菌(Hp)感染人类至少已有8.8 万~11.6万年[1]。但是30多年前(1983年),澳大利亚学者Barry Marshall和Robin Warren才首次分离培养了Hp,并证明这是一种可以导致胃炎、消化性溃疡的细菌。这一发现也成为了消化系统疾病诊治领域的重要里程碑。随后,研究证明,Hp感染是慢性胃炎和消化性溃疡最主要的病因(占70%~90%),是人类胃癌致病菌,但是清除Hp可以预防和降低上述胃部疾病的发生。那么如何准确检测Hp也就成为了清除Hp治疗的重要基础。 一、Hp检测方法的历史演变 Marshall和Warren是从胃炎患者的胃黏膜活检标本中分离培养出Hp的。在这两位学者之前,已有研究者在显微镜下观察到胃组织学标本中的“螺旋状细菌”[2]。他们所使用的就是最早的Hp的检测方法——组织学检查和分离培养。 在Marshall和Warren成功分离培养Hp后的两年,即1985年,McNulty发明了快速尿素酶试验(RUT);1987年,Gramham和Bell又发明了13C和14C尿素呼气试验(UBT);1990年,Hoshina创立了Hp的PCR检测法[2]。 之后,随着免疫学技术、分子生物学技术和内镜检测技术的快速发展,Hp检测技术中又陆续出现了血清学抗体检测、粪便Hp抗原检测(SAT)、内镜成像和其他的分子生物学检测方法。 二、Hp检测方法的差异性及影响因素 1.侵入性vs. 非侵入性 上述临床常用的Hp检测方法可以分为侵入和非侵入两大类。侵入性试验包括内镜成像、组织学检查、RUT、分离培养和以PCR为代表的分子生物学检测。非侵入性试验则包括UBT、SAT、Hp血清学检测和分子生物学检测。 侵入性检测需要通过胃镜取得活检标本后再对标本进行检测,其缺点是有一定创伤性,结果会受到活检部位的影响;但是可以同时明确有无胃癌、消化性溃疡、胃炎等重要疾病。 非侵入性检测无需经胃镜活检,是无创伤性且使用方便的检测方法,同时也避免了活检部位对结果的影响。 2.敏感性和特异性 各种Hp的临床常用检测方法在特异性、敏感性方面存在一定差异(表1)。其中,分离培养的特异性最高,但是敏感性最差。血清学试验的特异性最差。其他各种方法均具有相对较高的特异性和敏感性。 表1 临床常用Hp检测方法特异性、敏感性比较[3] 检测方法 敏感性 特异性 血清学试验 85% 79% UBT 75%~100% 77%~100% SAT 67%~100% 61%~100% 快速尿素酶试验 75%~100% 84%~100% 组织学检查 66%~100% 94%~100% PCR 75%~100% 84%~100% 分离培养 55%~56% 100% 3.影响Hp检测准确性的因素 ⑴药物 UBT、SAT、RUT、组织学检查、内镜成像技术都会受到药物的影响。具体包括:①抗生素、铋剂和某些具有抗菌作用的中药,这些药物可以抑制Hp生长,降低其活性;②PPI,作为常用的抑制胃酸分泌的药物,PPI可以显著提高胃内pH水平,从而抑制Hp尿素酶活性,因此会影响两种常用的尿素酶活性试验(UBT、RUT)的准确性,造成假阴性[4]。 [提示]:服用上述药物的患者只要在检测Hp前停用所服用的药物,就能消除对Hp检测结果的影响。服用PPI药物的患者在Hp检测前停用PPI至少2周,服用抗生素、铋剂和某些具有抗菌作用的中药的患者在Hp检测前停用药物至少4周[4]。 ⑵设备、检测者经验:分子生物学检测、内镜成像、分离培养、组织学检查都对设备或检测者经验方面有较高要求。 ⑶特殊临床情况:消化性溃疡出血、胃MALT淋巴瘤、胃黏膜严重萎缩、胃部分切除患者存在Hp干扰因素或Hp菌量少,易造成假阴性结果。 三、常用Hp检测方法优劣势及应用范围 1.尿素呼气试验(UBT) UBT是非侵入性检测方法中应用时间最长,临床应用最广的一种,其具有准确性相对较高、操作方便和不受Hp胃内灶性分布影响等优点,因此UBT是我国Hp感染专家共识认为的最受推荐的诊断方法,也是Hp清除治疗后疗效评估的首选方法[4]。 2.粪便Hp抗原检测(SAT) SAT也是一种操作简便、快速和安全的非侵入性检测方法,在我国因缺少相关试剂盒而较少应用。共识推荐SAT可作为诊断及根除治疗后疗效评价的备选方法,在尿素呼气试验配合欠佳人员(儿童等)的检测中更具优势[4]。 3.血清学检测 血清学试验的特异性低,其阳性不一定是现症感染,不能用于根除治疗后复查,因此其临床应用受限,更适用于一些特定情况,例如消化性溃疡出血、胃MALT淋巴瘤和严重胃黏膜萎缩[4]。 4.快速尿素酶试验(RUT) RUT是最快速、方便、经济的一种侵入性检测方法。但是,其检测结果受试剂pH值、取材部位、组织大小、细菌量、观察时间、环境温度及抗生素、质子泵抑制剂(PPIs)、急性胃出血等因素影响。多点活检可提高RUT检测准确性。患者接受胃镜检查时建议常规行RUT[4]。 5.组织学检查 组织学检查的诊断准确性高,但是结果受标本部位、大小、数量,染色方法和检测者经验及药物影响,且价格高。在组织学检查未能发现Hp时,可以联合UBT[4],以弥补标本及染色方法对结果的影响。 6.分离培养 分离培养的特异性最高,但是敏感性最低,同时操作复杂、耗时、需一定实验室条件、标本转送培养需专门的转送液并保持低温,受多种因素影响,不推荐单纯用于临床的常规诊断[4]。 7.内镜成像技术 内镜成像技术需要相应设备,检查医师需经过相关培训,其准确度和特异性也存在较大差异,因此目前不推荐常规应用[4]。 8.分子生物学检测 分子生物学检测是同属于非侵入和侵入的唯一一种检测方法,既可以用于检测胃黏膜标本,也可用于检测粪便、血清等标本。虽然PCR能更快速、更精确地检测Hp、Hp基因型及其耐药菌株,但成本、实验设备等都影响着PCR在临床的应用。目前,共识推荐将分子生物学检测用于Hp药物敏感度,即耐药基因的检测[4]。 四、结语 Hp的准确诊断是开展Hp根除治疗的重要依据,同时在根除治疗后,评价疗效及监测复发和再感染方面都发挥着重要作用。临床实践中,选择Hp感染的检测方法取决于每种方法的优缺点与可操作性以及每例患者独特的临床状况。我国的专家共识根据不同应用目的和检测样本进行了推荐,实际应用中可以结合2种或2种以上检测方法以获取最可靠的结果。在未来,研究者会持续改进Hp的检测方法,从而使Hp感染的诊断更为可靠,诊断模式更为合理。 参考文献: 1.张澍田,程芮.从不同角度看幽门螺杆菌.中华内科杂志, 2018,57(6) : 389-392. 2.胡伏莲,周殿元.幽门螺杆菌感染的基础与临床.1版.中国科学技术出版社,2002. 3.SK Patel , CB Pratap, AK Jain. Diagnosis of Helicobacter pylori : What should be the goldstandard?World Journal of Gastroenterology , 2014 , 20 (36) :12847-12859. 4.中华医学会消化病学分会幽门螺杆菌和消化性溃疡学组,全国幽门螺杆菌研究协作组.第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告.中华消化杂志, 2017,37(6):364-378.
幽门螺杆菌检测方法的发展与比较 幽门螺杆菌(Hp)感染人类至少已有8.8 万~11.6万年[1]。但是30多年前(1983年),澳大利亚学者Barry Marshall和Robin Warren才首次分离培养了Hp,并证明这是一种可以导致胃炎、消化性溃疡的细菌。这一发现也成为了消化系统疾病诊治领域的重要里程碑。随后,研究证明,Hp感染是慢性胃炎和消化性溃疡最主要的病因(占70%~90%),是人类胃癌致病菌,但是清除Hp可以预防和降低上述胃部疾病的发生。那么如何准确检测Hp也就成为了清除Hp治疗的重要基础。 一、Hp检测方法的历史演变 Marshall和Warren是从胃炎患者的胃黏膜活检标本中分离培养出Hp的。在这两位学者之前,已有研究者在显微镜下观察到胃组织学标本中的“螺旋状细菌”[2]。他们所使用的就是最早的Hp的检测方法——组织学检查和分离培养。 在Marshall和Warren成功分离培养Hp后的两年,即1985年,McNulty发明了快速尿素酶试验(RUT);1987年,Gramham和Bell又发明了13C和14C尿素呼气试验(UBT);1990年,Hoshina创立了Hp的PCR检测法[2]。 之后,随着免疫学技术、分子生物学技术和内镜检测技术的快速发展,Hp检测技术中又陆续出现了血清学抗体检测、粪便Hp抗原检测(SAT)、内镜成像和其他的分子生物学检测方法。 二、Hp检测方法的差异性及影响因素 1.侵入性vs. 非侵入性 上述临床常用的Hp检测方法可以分为侵入和非侵入两大类。侵入性试验包括内镜成像、组织学检查、RUT、分离培养和以PCR为代表的分子生物学检测。非侵入性试验则包括UBT、SAT、Hp血清学检测和分子生物学检测。 侵入性检测需要通过胃镜取得活检标本后再对标本进行检测,其缺点是有一定创伤性,结果会受到活检部位的影响;但是可以同时明确有无胃癌、消化性溃疡、胃炎等重要疾病。 非侵入性检测无需经胃镜活检,是无创伤性且使用方便的检测方法,同时也避免了活检部位对结果的影响。 2.敏感性和特异性 各种Hp的临床常用检测方法在特异性、敏感性方面存在一定差异(表1)。其中,分离培养的特异性最高,但是敏感性最差。血清学试验的特异性最差。其他各种方法均具有相对较高的特异性和敏感性。 表1 临床常用Hp检测方法特异性、敏感性比较[3] 检测方法 敏感性 特异性 血清学试验 85% 79% UBT 75%~100% 77%~100% SAT 67%~100% 61%~100% 快速尿素酶试验 75%~100% 84%~100% 组织学检查 66%~100% 94%~100% PCR 75%~100% 84%~100% 分离培养 55%~56% 100% 3.影响Hp检测准确性的因素 ⑴药物 UBT、SAT、RUT、组织学检查、内镜成像技术都会受到药物的影响。具体包括:①抗生素、铋剂和某些具有抗菌作用的中药,这些药物可以抑制Hp生长,降低其活性;②PPI,作为常用的抑制胃酸分泌的药物,PPI可以显著提高胃内pH水平,从而抑制Hp尿素酶活性,因此会影响两种常用的尿素酶活性试验(UBT、RUT)的准确性,造成假阴性[4]。 [提示]:服用上述药物的患者只要在检测Hp前停用所服用的药物,就能消除对Hp检测结果的影响。服用PPI药物的患者在Hp检测前停用PPI至少2周,服用抗生素、铋剂和某些具有抗菌作用的中药的患者在Hp检测前停用药物至少4周[4]。 ⑵设备、检测者经验:分子生物学检测、内镜成像、分离培养、组织学检查都对设备或检测者经验方面有较高要求。 ⑶特殊临床情况:消化性溃疡出血、胃MALT淋巴瘤、胃黏膜严重萎缩、胃部分切除患者存在Hp干扰因素或Hp菌量少,易造成假阴性结果。 三、常用Hp检测方法优劣势及应用范围 1.尿素呼气试验(UBT) UBT是非侵入性检测方法中应用时间最长,临床应用最广的一种,其具有准确性相对较高、操作方便和不受Hp胃内灶性分布影响等优点,因此UBT是我国Hp感染专家共识认为的最受推荐的诊断方法,也是Hp清除治疗后疗效评估的首选方法[4]。 2.粪便Hp抗原检测(SAT) SAT也是一种操作简便、快速和安全的非侵入性检测方法,在我国因缺少相关试剂盒而较少应用。共识推荐SAT可作为诊断及根除治疗后疗效评价的备选方法,在尿素呼气试验配合欠佳人员(儿童等)的检测中更具优势[4]。 3.血清学检测 血清学试验的特异性低,其阳性不一定是现症感染,不能用于根除治疗后复查,因此其临床应用受限,更适用于一些特定情况,例如消化性溃疡出血、胃MALT淋巴瘤和严重胃黏膜萎缩[4]。 4.快速尿素酶试验(RUT) RUT是最快速、方便、经济的一种侵入性检测方法。但是,其检测结果受试剂pH值、取材部位、组织大小、细菌量、观察时间、环境温度及抗生素、质子泵抑制剂(PPIs)、急性胃出血等因素影响。多点活检可提高RUT检测准确性。患者接受胃镜检查时建议常规行RUT[4]。 5.组织学检查 组织学检查的诊断准确性高,但是结果受标本部位、大小、数量,染色方法和检测者经验及药物影响,且价格高。在组织学检查未能发现Hp时,可以联合UBT[4],以弥补标本及染色方法对结果的影响。 6.分离培养 分离培养的特异性最高,但是敏感性最低,同时操作复杂、耗时、需一定实验室条件、标本转送培养需专门的转送液并保持低温,受多种因素影响,不推荐单纯用于临床的常规诊断[4]。 7.内镜成像技术 内镜成像技术需要相应设备,检查医师需经过相关培训,其准确度和特异性也存在较大差异,因此目前不推荐常规应用[4]。 8.分子生物学检测 分子生物学检测是同属于非侵入和侵入的唯一一种检测方法,既可以用于检测胃黏膜标本,也可用于检测粪便、血清等标本。虽然PCR能更快速、更精确地检测Hp、Hp基因型及其耐药菌株,但成本、实验设备等都影响着PCR在临床的应用。目前,共识推荐将分子生物学检测用于Hp药物敏感度,即耐药基因的检测[4]。 四、结语 Hp的准确诊断是开展Hp根除治疗的重要依据,同时在根除治疗后,评价疗效及监测复发和再感染方面都发挥着重要作用。临床实践中,选择Hp感染的检测方法取决于每种方法的优缺点与可操作性以及每例患者独特的临床状况。我国的专家共识根据不同应用目的和检测样本进行了推荐,实际应用中可以结合2种或2种以上检测方法以获取最可靠的结果。在未来,研究者会持续改进Hp的检测方法,从而使Hp感染的诊断更为可靠,诊断模式更为合理。 参考文献: 1.张澍田,程芮.从不同角度看幽门螺杆菌.中华内科杂志, 2018,57(6) : 389-392. 2.胡伏莲,周殿元.幽门螺杆菌感染的基础与临床.1版.中国科学技术出版社,2002. 3.SK Patel , CB Pratap, AK Jain. Diagnosis of Helicobacter pylori : What should be the goldstandard?World Journal of Gastroenterology , 2014 , 20 (36) :12847-12859. 4.中华医学会消化病学分会幽门螺杆菌和消化性溃疡学组,全国幽门螺杆菌研究协作组.第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告.中华消化杂志, 2017,37(6):364-378.
谈“Hp”色变:该检测吗?怎样检测? 幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)感染是一种常见的慢性感染性疾病。在过去的30年中,由于全球人口的增长、Hp根除失败、Hp重复感染等因素,Hp感染人数有增长的趋势[1]。研究结果表明[2],全球近一半人口感染了Hp,且不同地理区域、不同国家的人群Hp感染的现患率差异较大,现患率最高的三个区域分别为非洲(79.1%),拉丁美洲和加勒比地区(54.7%)以及亚洲(54.7%),最低的两个区域为北美洲(37.1%)和大洋洲(24.4%),该研究中显示我国的现患率为55.8%,这是做了Hp检测,显示为阳性的人群,实际的感染人群应该更大。 如此高的感染率,对实际工作中的Hp诊断的规范性提出了挑战,毕竟对人群进行大规模Hp普查并不现实,那么究竟哪些人群需要进行Hp检测?应该如何检测? 哪些人群需要进行Hp检测? 在我国最新的幽门螺杆菌感染处理共识报告中[3],对Hp的根除指征进行了规范(表1),当考虑患者存在根除适应证时,需要积极地进行Hp检测。而且指南指出,在对Hp进行清除治疗后,应进行复查以明确Hp是否已经被根除[4]。 表1 幽门螺杆菌根除指征 幽门螺杆菌阳性 强烈推荐 推荐 消化性溃疡(无论是否活动和有无并发症史) ✔️ 胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤 ✔️ 慢性胃炎伴消化不良症状 ✔️ 慢性胃炎伴胃黏膜萎缩、糜烂 ✔️ 早期胃肿瘤已行内镜下切除或胃次全切手术 ✔️ 长期服用质子泵抑制剂 ✔️ 胃癌家族史 ✔️ 计划长期服用非甾体抗炎药(包括低剂量阿司匹林) ✔️ 不明原因的缺铁性贫血 ✔️ 特发性血小板减少性紫癜 ✔️ 其他幽门螺杆菌相关疾病(淋巴细胞性胃炎、增生性胃息肉、Menetrier病) ✔️ 证实有幽门螺杆菌感染 ✔️ 如何选择Hp的检测方式? Hp的检测包括了侵入式和非侵入式两大类,每一类均有不同的检测方式(图1)。 图1 Hp检测方式 由上图可以看出Hp检测方式较多,所以医生应根据患者的实际情况建立诊断思路,规范选择合适的检测方式[5](图2),对患者目前是否被Hp感染以及根除治疗后的Hp根除情况进行科学的评估,避免诊断结果的偏差。 图1 诊断Hp感染流程图 总的来说,经过初步判断后认为患者需行Hp检测时,首先应判断该患者是否有行胃镜检查的指征。当患者存在胃镜检查指征时,就需要考虑采用侵入式检测方式。不同检测方式的选择同样是有要求的,如患者近期使用过PPI/铋剂/抗生素,在胃镜检查时发现活动性出血或者镜下表现提示需要活检时,则需要在胃镜检查时取活检进行组织学检查,否则的话行快速尿素酶试验即可。Hp培养、PCR检测虽然特异性高,但是操作过程需要较高的试验条件,且操作复杂耗时、费用高,多用于药敏试验指导临床用药,亦可用于科研。侵入式检测一个较为明显的缺点是在活检时可能由于Hp在胃内分布不均,未取得Hp感染灶而出现一个假阴性结果。所以如图1所示,如果患者在活检后为Hp检测为阴性结果,应进一步采取非侵入的检测方式进一步确认。 如果患者没有胃镜指征,则考虑采用非侵入的检测方式。即同位素示踪法、粪便Hp抗原检测以及血清抗体检测。但这些检测方式并不适合所有的患者,在对患者进行检测时也是有选择性的。在同位素示踪法中,呼气试验与N排出试验相比,操作更为简便易行,患者接受程度更高。呼气试验和粪便抗原检测均可用于Hp的现症感染和清除效果的评估。研究结果表明,呼气试验的敏感性和特异性均超过了95%[6]。粪便抗原检测诊断的敏感性和特异性均超过了92%[6, 7]。在目前发表的指南中,部分指南并没有明确呼气试验和粪便抗原检测相比,哪个更应该优先被选择作为非侵入检测方式的首选[4, 8]。但是也有指南因为呼气试验的准确性更高而推荐了其作为非侵入检测方式的首选[9]。而对于血清Hp抗体检测而言,在Hp感染后,血清中的抗体会持续多年,研究结果表明,血清学检测对于Hp现症感染检测的敏感性已经<80%[6],所以与其他的非侵入式检测方式相比,血清学检测在评估Hp现症感染和清除效果两个方面,均不占优势。 由此可知,对于需要行Hp检测的患者,如果该患者有胃镜指征,则需要根据患者近期的服药史及镜下所见选择合适的检测方式来评估患者是否有Hp感染,而对于没有胃镜指征的患者来讲,采取呼气试验进行Hp现症感染及根除治疗后的评估是一种相对来说比较简便可靠的检测方式。 总结 根据目前的研究结果,Hp感染率依然居高不下。由于Hp感染与多种疾病相关,所以临床医生在工作中应谨慎甄别需进行Hp检测的人群,并建立科学的诊断思路,做到根据患者的病情个性化的选择诊断方式。 参考文献: 1.Hu, Y., et al., Systematic review with meta-analysis: the global recurrence rate of Helicobacter pylori. Aliment Pharmacol Ther, 2017. 46(9): p. 773-779. 2.Hooi, J.K.Y., et al., Global Prevalence of Helicobacter pylori Infection: Systematic Review and Meta-Analysis. Gastroenterology, 2017. 153(2): p. 420-429. 3.刘文忠, et al., 第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告. 中华消化杂志, 2017. 37(06): p. 364-378. 4.Chey, W.D., et al., ACG Clinical Guideline: Treatment of Helicobacter pylori Infection. Am J Gastroenterol, 2017. 112(2): p. 212-239. 5.J Thomas Lamont, M.F., Shilpa Grover. Indications and diagnostic tests for Helicobacter pylori infection. 2020; Available from: http://tieba.baidu.com/mo/q/checkurl?url=https%3A%2F%2Fwww.uptodate.com%2Fcontents%2Fimage%3FtopicKey%3DGAST%252F18%26search%3DHelicobacter%2520pylori%26view%3Dpowerpoint%26imageKey%3DGAST%252F112677%26rank%3D2~150%26source%3Dsee_link%26sp%3D0.&urlrefer=f1150f4a89d41d05a7c62699e0cc907f 6.Chey, W.D., B.C. Wong, and G. Practice Parameters Committee of the American College of, American College of Gastroenterology guideline on the management of Helicobacter pylori infection. Am J Gastroenterol, 2007. 102(8): p. 1808-25. 7.Veijola, L., et al., Stool antigen tests in the diagnosis of Helicobacter pylori infection before and after eradication therapy. World J Gastroenterol, 2005. 11(46): p. 7340-4. 8.El-Serag, H.B., et al., Houston Consensus Conference on Testing for Helicobacter pylori Infection in the United States. Clin Gastroenterol Hepatol, 2018. 16(7): p. 992-1002 e6. 9.Malfertheiner, P., et al., Management of Helicobacter pylori infection-the Maastricht V/Florence Consensus Report. Gut, 2017. 66(1): p. 6-30.
幽门螺杆菌检测方法的发展与比较 幽门螺杆菌(Hp)感染人类至少已有8.8 万~11.6万年[1]。但是30多年前(1983年),澳大利亚学者Barry Marshall和Robin Warren才首次分离培养了Hp,并证明这是一种可以导致胃炎、消化性溃疡的细菌。这一发现也成为了消化系统疾病诊治领域的重要里程碑。随后,研究证明,Hp感染是慢性胃炎和消化性溃疡最主要的病因(占70%~90%),是人类胃癌致病菌,但是清除Hp可以预防和降低上述胃部疾病的发生。那么如何准确检测Hp也就成为了清除Hp治疗的重要基础。 一、Hp检测方法的历史演变 Marshall和Warren是从胃炎患者的胃黏膜活检标本中分离培养出Hp的。在这两位学者之前,已有研究者在显微镜下观察到胃组织学标本中的“螺旋状细菌”[2]。他们所使用的就是最早的Hp的检测方法——组织学检查和分离培养。 在Marshall和Warren成功分离培养Hp后的两年,即1985年,McNulty发明了快速尿素酶试验(RUT);1987年,Gramham和Bell又发明了13C和14C尿素呼气试验(UBT);1990年,Hoshina创立了Hp的PCR检测法[2]。 之后,随着免疫学技术、分子生物学技术和内镜检测技术的快速发展,Hp检测技术中又陆续出现了血清学抗体检测、粪便Hp抗原检测(SAT)、内镜成像和其他的分子生物学检测方法。 二、Hp检测方法的差异性及影响因素 1.侵入性vs. 非侵入性 上述临床常用的Hp检测方法可以分为侵入和非侵入两大类。侵入性试验包括内镜成像、组织学检查、RUT、分离培养和以PCR为代表的分子生物学检测。非侵入性试验则包括UBT、SAT、Hp血清学检测和分子生物学检测。 侵入性检测需要通过胃镜取得活检标本后再对标本进行检测,其缺点是有一定创伤性,结果会受到活检部位的影响;但是可以同时明确有无胃癌、消化性溃疡、胃炎等重要疾病。 非侵入性检测无需经胃镜活检,是无创伤性且使用方便的检测方法,同时也避免了活检部位对结果的影响。 2.敏感性和特异性 各种Hp的临床常用检测方法在特异性、敏感性方面存在一定差异(表1)。其中,分离培养的特异性最高,但是敏感性最差。血清学试验的特异性最差。其他各种方法均具有相对较高的特异性和敏感性。 表1 临床常用Hp检测方法特异性、敏感性比较[3] 检测方法 敏感性 特异性 血清学试验 85% 79% UBT 75%~100% 77%~100% SAT 67%~100% 61%~100% 快速尿素酶试验 75%~100% 84%~100% 组织学检查 66%~100% 94%~100% PCR 75%~100% 84%~100% 分离培养 55%~56% 100% 3.影响Hp检测准确性的因素 ⑴药物 UBT、SAT、RUT、组织学检查、内镜成像技术都会受到药物的影响。具体包括:①抗生素、铋剂和某些具有抗菌作用的中药,这些药物可以抑制Hp生长,降低其活性;②PPI,作为常用的抑制胃酸分泌的药物,PPI可以显著提高胃内pH水平,从而抑制Hp尿素酶活性,因此会影响两种常用的尿素酶活性试验(UBT、RUT)的准确性,造成假阴性[4]。 [提示]:服用上述药物的患者只要在检测Hp前停用所服用的药物,就能消除对Hp检测结果的影响。服用PPI药物的患者在Hp检测前停用PPI至少2周,服用抗生素、铋剂和某些具有抗菌作用的中药的患者在Hp检测前停用药物至少4周[4]。 ⑵设备、检测者经验:分子生物学检测、内镜成像、分离培养、组织学检查都对设备或检测者经验方面有较高要求。 ⑶特殊临床情况:消化性溃疡出血、胃MALT淋巴瘤、胃黏膜严重萎缩、胃部分切除患者存在Hp干扰因素或Hp菌量少,易造成假阴性结果。 三、常用Hp检测方法优劣势及应用范围 1.尿素呼气试验(UBT) UBT是非侵入性检测方法中应用时间最长,临床应用最广的一种,其具有准确性相对较高、操作方便和不受Hp胃内灶性分布影响等优点,因此UBT是我国Hp感染专家共识认为的最受推荐的诊断方法,也是Hp清除治疗后疗效评估的首选方法[4]。 2.粪便Hp抗原检测(SAT) SAT也是一种操作简便、快速和安全的非侵入性检测方法,在我国因缺少相关试剂盒而较少应用。共识推荐SAT可作为诊断及根除治疗后疗效评价的备选方法,在尿素呼气试验配合欠佳人员(儿童等)的检测中更具优势[4]。 3.血清学检测 血清学试验的特异性低,其阳性不一定是现症感染,不能用于根除治疗后复查,因此其临床应用受限,更适用于一些特定情况,例如消化性溃疡出血、胃MALT淋巴瘤和严重胃黏膜萎缩[4]。 4.快速尿素酶试验(RUT) RUT是最快速、方便、经济的一种侵入性检测方法。但是,其检测结果受试剂pH值、取材部位、组织大小、细菌量、观察时间、环境温度及抗生素、质子泵抑制剂(PPIs)、急性胃出血等因素影响。多点活检可提高RUT检测准确性。患者接受胃镜检查时建议常规行RUT[4]。 5.组织学检查 组织学检查的诊断准确性高,但是结果受标本部位、大小、数量,染色方法和检测者经验及药物影响,且价格高。在组织学检查未能发现Hp时,可以联合UBT[4],以弥补标本及染色方法对结果的影响。 6.分离培养 分离培养的特异性最高,但是敏感性最低,同时操作复杂、耗时、需一定实验室条件、标本转送培养需专门的转送液并保持低温,受多种因素影响,不推荐单纯用于临床的常规诊断[4]。 7.内镜成像技术 内镜成像技术需要相应设备,检查医师需经过相关培训,其准确度和特异性也存在较大差异,因此目前不推荐常规应用[4]。 8.分子生物学检测 分子生物学检测是同属于非侵入和侵入的唯一一种检测方法,既可以用于检测胃黏膜标本,也可用于检测粪便、血清等标本。虽然PCR能更快速、更精确地检测Hp、Hp基因型及其耐药菌株,但成本、实验设备等都影响着PCR在临床的应用。目前,共识推荐将分子生物学检测用于Hp药物敏感度,即耐药基因的检测[4]。 四、结语 Hp的准确诊断是开展Hp根除治疗的重要依据,同时在根除治疗后,评价疗效及监测复发和再感染方面都发挥着重要作用。临床实践中,选择Hp感染的检测方法取决于每种方法的优缺点与可操作性以及每例患者独特的临床状况。我国的专家共识根据不同应用目的和检测样本进行了推荐,实际应用中可以结合2种或2种以上检测方法以获取最可靠的结果。在未来,研究者会持续改进Hp的检测方法,从而使Hp感染的诊断更为可靠,诊断模式更为合理。 参考文献: 1.张澍田,程芮.从不同角度看幽门螺杆菌.中华内科杂志, 2018,57(6) : 389-392. 2.胡伏莲,周殿元.幽门螺杆菌感染的基础与临床.1版.中国科学技术出版社,2002. 3.SK Patel , CB Pratap, AK Jain. Diagnosis of Helicobacter pylori : What should be the goldstandard?World Journal of Gastroenterology , 2014 , 20 (36) :12847-12859. 4.中华医学会消化病学分会幽门螺杆菌和消化性溃疡学组,全国幽门螺杆菌研究协作组.第五次全国幽门螺杆菌感染处理共识报告.中华消化杂志, 2017,37(6):364-378.
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